细胞光密度计正确校准、空白设置与光程校正指南

　　空白值校准：使用空白稀释液（如无菌蒸馏水或缓冲液）进行上样，连续测量3-4次，取最大值作为空白值。此步骤可消除培养基、试剂及仪器本身的光学干扰，确保测量基线准确。

　　标准物质比对：通过测量已知浓度的标准样品（如特定OD值的菌液或荧光标记细胞），计算仪器示值误差。例如，大肠杆菌在OD600=0.1时对应约8×10⁷cells/mL，通过比对可验证仪器线性范围（通常0-1.0OD）及准确性。

　　重复性评估：重复测量同一标准样品10次，计算相对标准偏差（RSD）。优质仪器RSD应≤1%，确保数据稳定性。

　　空白设置要点

　　比色皿清洁：使用无尘布擦拭比色皿外壁，避免指纹或污渍干扰透光率。推荐使用石英或高透光PMMA材质比色皿，减少光学损耗。

　　环境光控制：关闭实验室光源或使用遮光罩，避免外界光干扰。部分仪器（如LED冷光源型）自带遮光设计，可简化操作。

　　软件调零：将空白比色皿放入样品室后，通过仪器软件执行“调零”或“校准100%T/0Abs”操作，确保透光率（T%）或吸光度（Abs）基线准确。

　　光程校正方法

　　固定光程比色皿：使用标准光程（如10mm）比色皿，避免不同厚度比色皿导致光程误差。若需变光程测量，需通过仪器软件输入实际光程值进行校正。

　　路径优化：确保光路中无遮挡物（如气泡、杂质），定期清洁样品室及比色皿架，防止光路偏移。部分仪器配备自动光路校准功能，可简化操作。

　　温度补偿：若仪器无自动温度补偿功能，需在恒温环境下操作（如25℃），避免温度波动影响光密度测量结果。