智能微生物限度仪是一种集自动化、智能化与高精度于一体的现代微生物检测设备,广泛应用于药品、食品、化妆品、医疗器械及水质等行业的微生物限度检查。通常由主机控制系统、无菌操作平台、自动移液系统、恒温培养单元及智能图像分析软件组成。用户只需将样品放入指定位置,设定检测参数,仪器即可自动完成从样品处理到结果判定的全过程。其内置的AI算法可对菌落形态进行智能识别与计数,有效避免主观判断偏差。
智能微生物限度仪的操作步骤可归纳为以下清晰流程,结合仪器特性与实验规范整理如下:
一、实验前准备
环境与人员消毒
在洁净工作台或无菌室(C级)操作,提前30分钟开启紫外灯/臭氧消毒环境。
操作人员穿戴无菌服、口罩、手套,用75%乙醇棉球消毒双手及台面。
仪器检查与校准
检查真空泵、滤杯、管路密封性,确保无漏气。
根据样品性质选择滤膜:
孔径:0.45μm(常规检测)或1.0μm(含颗粒样品)。
材质:混合纤维素酯(需无菌包装)。
校准仪器参数(如压力、温度、时间),确保符合检测标准。
样品与试剂准备
样品处理:
固体样品(如口罩):称取10g剪碎,加入200ml灭菌生理盐水,用拍打仪混匀。
含颗粒样品:过滤或离心去除悬浮物,防止堵塞滤膜。
试剂准备:
无菌生理盐水、培养基(如TSA琼脂用于细菌,沙氏琼脂用于真菌)、中和剂(如需)。
二、仪器组装与灭菌
滤膜安装
用火焰喷枪快速灼烧底座与滤杯接口灭菌。
无菌镊子夹取滤膜(光面朝上),平铺于底座滤网上,扣紧滤杯。
管路连接
硅胶管一端套在过滤装置出液口,另一端套在收集瓶进液口。
另一根硅胶管一端套在收集瓶抽气端,另一端通过不锈钢宝塔接头连接真空泵。
三、样品过滤与集菌
倒入样品
将处理后的样品倒入滤杯,液面不超过最大刻度,避免溢出。
开启真空泵,控制负压20–30kPa,缓慢抽滤。
冲洗滤膜
过滤完成后,用50–100ml灭菌生理盐水冲洗滤膜3次,去除残留抑菌成分。
若样品含强抑菌物质,需增加冲洗体积至200–300ml,并在培养基中加入中和剂。
四、滤膜转移与培养
取出滤膜
关闭泵阀,用无菌镊子取出滤膜,菌面朝上平贴于培养基表面,确保无气泡。
培养条件
细菌培养:TSA琼脂,30–35℃培养3–5天。
真菌培养:沙氏琼脂,20–25℃培养5–7天。
逐日观察并记录菌落生长情况。
五、实验后处理
仪器清洁
滤杯、滤网等部件拆卸后,用洗涤剂浸泡冲洗,75%乙醇擦拭。
真空泵定期更换润滑油,防止污染。
仪器保存
断电后,滤杯干燥保存,整机覆盖防尘罩。
长期停用前,用乙醇冲洗管路。
数据记录
完整记录样品信息、过滤参数、培养结果等。
每月用标准菌株(如大肠埃希菌ATCC 25922)验证过滤效率及计数准确性。
